Исследование ко-экспрессии белков p16INK4a и Ki-67 для улучшения диагностики заболеваний шейки матки

Введение

Эффективное выявление женщин с ЦИН высокой степени при обычном скрининге рака шейки матки представляет значительную проблему для системы здравоохранения. В связи с низкой распространенностью предраковых поражений высокой степени (менее 1% среди женщин, проходящих скрининговое обследование) большое значение имеет доступность скрининговых тестов и процедур, позволяющих с высокой чувствительностью и специфичностью выявить женщин с подтвержденными ЦИН высокой степени.

Исследование ко-экспрессии белков p16INK4a и Ki-67 предназначено для одновременного качественного определения белков p16INK4a и Ki-67 иммуноцитохимическим методом в цитологических препаратах, приготовленных из материала, который был получен путем соскоба с шейки матки. Выполнение этого исследования позволяет выявить женщин с цервикальными интраэпителиальными неоплазиями высокой степени среди женщин, проходящих скрининговое обследование, а также среди женщин, у которых при цитологическом исследовании по Папаниколау были выявлены плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени или плоскоклеточная атипия неопределенной значимости, и среди женщин с положительными результатами теста на вирусы папилломы человека высокого онкогенного риска.

Научное обоснование

В эукариотических клетках контроль клеточного цикла осуществляется комплексом белков, активность которых регулируется как на уровне экспрессии, так и путем посттрансляционных модификаций (например, фосфорилирования). Белок p16INK4a играет важную роль в регуляции клеточного цикла эукариот. Этот белок участвует в опосредованном белком ретинобластомы (pRB) контроле перехода клетки из фазы G1 в фазу S и запускает остановку клеточного цикла в процессе дифференцировки клеток. Таким образом, экспрессия белка p16INK4a во время нормального клеточного цикла оказывает антипролиферативный эффект. В окончательно дифференцированных эпителиальных клетках p16INK4a экспрессируется в количестве, которое обычно не позволяет выявить этот белок иммуноцитохимическим методом.

Связанный с пролиферацией белок Ki-67 обнаруживается только в ядрах пролиферирующих клеток. При тщательном изучении клеточного цикла было показано, что антиген Ki-67 присутствует в определяемом количестве во всех фазах клеточного цикла, в том числе в фазу митоза, тогда как неделящиеся клетки, которые больше не делятся, то есть находятся в фазе покоя G0, этот антиген не экспрессируют.

Поскольку клетки, усиленно экспрессирующие p16INK4a, могут активно пролиферировать только при нарушении регуляции клеточного цикла, в нормальных физиологических условиях одновременная экспрессия маркера пролиферации Ki-67 и p p16INK4a в одной и той же клетке невозможна. В связи с этим одновременная экспрессия Ki-67 и p16INK4a в отдельных клетках может рассматриваться как признак нарушения механизмов регуляции клеточного цикла в соответствующих клетках.

Клиническая значимость

Исследование ко-экспрессии Ki-67 и p16INK4a позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью выявить женщин с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями высокой степени:

• при скрининговом обследование (в качестве дополнения к жидкостной цитологии)
• при результатах жидкостной цитологии, классифицированных как плоскоклеточная атипия неопределенной значимости (ASCUS) или плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени (LSIL)
• при отрицательных результатами жидкостной цитологии и положительных результатах теста на ВПЧ